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          2. 【AbMole科研快報】建立模型以評估表達多細胞角蛋白19的細胞在多能基質細胞誘導的胰島再生過程中的作用

            來源: AbMole中國   2020-11-26   訪問量:230評論(0)

            AbMole精研抑制劑十年,最新的科研動態不斷與您分享。本期與您分享的是:多細胞角蛋白19的細胞在多能基質細胞誘導的胰島再生過程中的作用評估模型。

            以前,人骨髓源性多能基質細胞(hMSC)中Wnt信號的藥理活化產生了條件培養基(CM),該培養基促進了鏈脲佐菌素處理的小鼠中β細胞的再生。導管損傷的內分泌祖細胞已被證明可在胰腺損傷后產生β細胞,是“信號接收細胞”的候選者。通過純化活的Dolichos Biflorus凝集素凝集素+細胞并在添加了未經處理,受Wnt激活或受Wnt抑制的CM的基本培養基中培養而獲得的來自胰腺小鼠的導管(CK19 +)細胞顯示,在48小時后,EdU + / CK19 +細胞的比例顯著增加補充,但沒有內分泌表型獲得。用他莫昔芬(單劑量)治療的譜系追蹤CK19-CreERT; Ai9(RCL-tdT)小鼠表現出胰腺CK19 +細胞的特異性標記。鏈脲佐菌素治療(60 mg / kg /天,5天)導致β細胞質量,胰島密度和胰島素+細胞頻率降低,以及葡萄糖耐量降低和胰腺白細胞浸潤增加。該模型將在以后的研究中用于在hMSC CM誘導的胰島再生過程中沿襲追蹤CK19 +細胞的貢獻。

            GSK-3α和GSK-3β抑制劑CHIR-99021(Abmole, M1692,純度>99%) ,在本研究中用于驗證CHIR99021和IWR-1對hMSC細胞內β-catenin的影響。

            Figure 2.4 Treatment of hMSC with CHIR99021 increased intracellular β-catenin.

            由于GSK3抑制劑CHIR99021促進了β-catenin破壞復合物的失穩,增加了β-catenin在細胞內的儲存,從而影響了與細胞生長,增殖和分化有關的因子的轉錄。經過24小時處理后,與DMSO對照相比,用10μM,15μM或20μMCHIR99021在不含血清的基礎AmniomaxTM培養基中處理的hMSC通過流式細胞術顯示細胞內β-catenin的平均熒光強度(MFI)顯著增加。

            鳴謝:Brianna Ananthan, The University of Western Ontario.



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