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          2. 【AbMole科研快報】一種新型環狀RNA hsa_circRNA_103809/miR-377-3p/GOT1通路調控順鉑

            來源: AbMole中國   2020-11-27   訪問量:228評論(0)

            AbMole精研抑制劑十年,最新的科研動態不斷與您分享。本期與您分享的是:一種新型環狀RNA hsa_circRNA_103809/miR-377-3p/GOT1通路調控順鉑-非小細胞肺癌的耐藥研究

            順鉑是治療非小細胞肺癌( NSCLC)的一線化療藥物,越來越多的證據表明靶向環狀RNA(circRNAs)成為提高NSCLC順鉑敏感性的有效策略,但具體機制尚不明確;诖,本研究證實了一種新的hsa_circRNA_103809/miR-377-3p/GOT1信號級聯在體內外實驗中造成NSCLC順鉑耐藥性。機制上,原代的順鉑敏感NSCLC (CS-NSCLC)細胞在連續低劑量順鉑刺激下產生順鉑耐藥的NSCLC (CR-NSCLC)細胞。研究人員發現在CR-NSCLC細胞中hsa_circRNA_103809GOT1上調,而miR-377-3p下調。進一步的實驗證實hsa_circRNA_103809miR-337-3p作用,可上調CS-NSCLC細胞中的GOT1。有趣的是,實驗對藥物功能的考察中發現,敲除hsa_circRNA_103809后,可增強順鉑對CR-NSCLC細胞增殖和生存能力的抑制作用,并誘導細胞凋亡。相反,下調miR-377-3p和過表達GOT1則可逆轉細胞凋亡。由此可知,hsa_circRNA_103809的過表達通過調控miR-377-3p/GOT1軸增加了CS-NSCLC細胞對順鉑的耐藥性。此外,研究人員利用CR-NSCLC細胞建立了異位荷瘤小鼠模型,證明沉默hsa_circRNA_103809后,可增加順鉑治療對NSCLC細胞生長的抑制作用。綜上所述,數據分析表明,靶向hsa_circRNA_103809/miR-377-3p/GOT1通路增加了CR-NSCLC細胞對順鉑的敏感性,本研究為臨床上改善NSCLC的順鉑耐藥性問題提供了新的思路。

            CCK-8試劑盒 (Abmole, M4839)MTT 法的替代方法,是一種基于WST(水溶性四唑鹽,化學名:2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑單鈉鹽)的廣泛應用于細胞增殖和細胞毒性的快速高靈敏度檢測試劑盒。

            作者在研究過程中,首先建立了耐藥細胞株。通過低劑量順鉑連續逐級增加濃度,誘導出耐順鉑的細胞模型。在A-C中,采用CCK-8法檢測CS-NSCLCCR-NSCLC細胞的增殖能力,獲得了優質的數據結果。其中,CCK-8試劑盒購自Abmol。CCK試劑盒使用方便,省去了洗滌細胞,不需要同位素和有機溶劑;檢測靈敏度高,甚至可以測定較低細胞密度;其重復性也優于MTT法。

            鳴謝:Xiang Zhu, Jing Han, Huiyin Lan et al. A Novel Circular RNA hsa_circRNA_103809/miR-377-3p/GOT1 Pathway Regulates Cisplatin-Resistance in Non-Small Cell Lung Cancer (NSCLC), 03 August 2020, PREPRINT (Version 1) available at Research Square



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