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          2. 一步解決細胞培養板選擇困擾全程干貨

            來源: 上海聯碩生物科技有限公司   2020-11-30   訪問量:269評論(0)

            細胞培養板作為培養細胞的一種常用和重要的工具,形狀、規格、用途多樣,你是否也為如何選擇適合的培養板而迷茫?你是否正為如何方便、正確的使用培養板而苦惱?你對如何處理培養板是否也有困惑?對不同的培養板各有什么妙用你又有何體會?

            細胞培養板依底部形狀的不同可分為平底和圓底(U 型和V 型);培養孔的孔數有 6、12、24、48、96、384、1536 孔等;根據材質的不同有 Terasaki 板和普通細胞培養板。具體選擇時根據培養細胞的類型、所需培養體積及不同的實驗目的而定。

            平底和圓底(U型和V型)培養板的區別和選擇

            不同形狀的板子自然有不同用途。平底的什么類型的細胞都可用,但當細胞數目較少,如做克隆時,就用 96 孔平底板;另外,做 MTT 等實驗時,無論貼壁和懸浮細胞,一般均用平底板。這樣便于鏡下觀測、有明確的底面積、細胞培養液面高度相對一致,還便于 MTT 檢測。

            至于 U 或 V 型板,一般在某些特殊要求時才使用。如在免疫學方面,當做兩種不同淋巴細胞混合培養時,需要二者相互接觸以刺激。因此,一般需要 U 型板,因細胞會由于重力的作用而聚集在一個很小的范圍內。V 型板的用途更少,一般用于細胞殺傷實驗時,為了使效靶細胞緊密接觸,常使用 V 型板,但這種實驗也可用 U 型板替代(加入細胞后﹐低速離心)。除此之外,圓底還可以拿來做分析、化學反應、同位素摻入的實驗或是保存樣品用。

            孔數的選擇

            流式一般用 6 孔,MTT 一般用 96 孔,細胞爬片一般用 24 孔等,要具體根據你的實驗來定。

            Terasaki 板和普通細胞培養板的區別

            Terasakiplate 主要是用于晶體學研究,產品設計便于對晶體的觀察與結構分析。有 sitting 和 handing drop 兩種方法。兩種方法應用產品的外形結構也不同,材料上選擇 crystal class polymer,特殊的材料有利觀察晶體結構。

            細胞培養板主要材料是 treated sufface,便于細胞貼壁生長與伸展。當然還與浮游細胞的生長材料,降低結合表面積有關,取決于實驗材料上的應用與對材料的選擇。

            細胞培養板與酶標板的區別

            用多孔細胞培養板測吸光度肯定可以,可以用它來做樣品的蛋白定量和 MTT 檢測。

            區別:酶標板一般要比細胞培養板貴,細胞板主要做細胞培養,但也可以用來測蛋白濃度;酶標板包括包被板和反應板,一般不能用做細胞培養,它主要做免疫酶聯反應后的蛋白檢測,它需要更高的要求還需要特定的酶標工作液。

            常用不同培養板的孔底面積及推薦加液量

            不同孔板所加培養液的液面都不宜太深,一般在 2-3 mm 范圍,結合不同孔的底面積就可算出各培養孔的適宜加液量。若加液量過多會影響氣體(氧氣)交換,而且在搬動過程中易溢出造成污染。具體所加細胞密度依實驗的目的不同靈活掌握。

            培養器皿

            面積(cm2

            培養液量(ml)

            細胞量

            96 孔培養板

            0.32

            0.1

            105

            24 孔培養板

            2

            1.0

            5×105

            12 孔培養板

            4.5

            2.0

            106

            6 孔培養板

            9.6

            2.5

            2.5×106

            3.5 cm 培養皿

            8

            3.0

            2×106

            6 cm 培養皿

            21

            5.0

            5.2×106

            10 cm 培養皿

            55

            10.0

            13.7×106

            25 cm2 培養瓶

            25

            5.0

            5×106

            75 cm2 培養瓶

            75

            15~30

            2×107



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